Q129.
行管柱層析時，應分離之試樣應在何過程加入
化學 · 丙級 · 一般基本操作 · Q129
難易度分析
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本題考查實驗操作的精確時機，需區分不同加樣時間對色帶寬度及分離解析度的影響，選項中包含多個容易混淆的操作時間點，要求對標準操作流程有準確的記憶。
正確答案：③等溶劑降至靜相表面時加入
③ 等溶劑降至靜相表面時加入:當溶劑液面降至靜相表面時加入試樣，可使樣品以最窄的色帶吸附於管柱頂端，此為管柱層析標準加樣時機，能確保後續沖提時獲得最佳分離效率。
錯誤選項解析
- ① 混在靜相吸著物填入管內:將試樣混入靜相吸著物中填入管內會導致樣品與固定相均勻混合，無法形成明確的起始色帶，使分離效果完全失效。正確做法應將樣品加於已裝填完成之管柱頂部。
- ② 管柱填好後立刻加入溶劑中:管柱填好後若管柱內尚存大量溶劑即加入樣品，會造成樣品被過度稀釋，導致起始色帶過寬，降低解析度。應等待溶劑液面降至靜相表面後再加樣。
- ④ 等溶劑流下靜相表面約10 公分時加入:等待溶劑流下靜相表面約10公分時，代表靜相已乾涸，此時加樣會造成樣品滲入吸附劑孔隙中，導致色帶拖尾與分離不良。管柱層析過程中靜相絕不可乾掉。
Learning Tip
"管柱層析的核心關鍵在於維持窄起始色帶以確保分離解析度。加樣時機必須在溶劑液面恰好降至靜相表面時進行，過早加樣會稀釋樣品，過晚則靜相乾涸破壞分離效果。實務上常考混淆點為薄層層析與管柱層析的操作差異，以及濕式裝柱與乾式裝柱的適用情境。"
學員答題分佈
①混在靜相吸著物填入管內0%
②管柱填好後立刻加入溶劑中0%
③等溶劑降至靜相表面時加入0%
④等溶劑流下靜相表面約10 公分時加入0%
此答題分佈是根據學員在 LongePass 模擬考等實際作答紀錄計算而成。與考友分享這道歷屆試題與詳細解析！